Jak wygląda badanie mikrobiologiczne? Posiew, identyfikacja i antybiogram

4 min czytania
Jak wygląda badanie mikrobiologiczne? Posiew, identyfikacja i antybiogram

Gdy lekarz podejrzewa zakażenie, często zleca badanie mikrobiologiczne – np. posiew moczu, wymaz z gardła, posiew krwi lub rany. Jego celem jest ustalenie, jaki drobnoustrój wywołał infekcję i na jakie leki jest wrażliwy. Wyjaśniamy, co dzieje się z próbką od chwili pobrania do wydania wyniku.

1. Pobranie materiału

To najważniejszy i najczęściej niedoceniany etap. Próbka musi pochodzić z miejsca zakażenia i nie może zostać zanieczyszczona bakteriami ze skóry czy błon śluzowych. Dlatego:

  • mocz do posiewu pobiera się ze środkowego strumienia, po umyciu okolic intymnych, do jałowego pojemnika, najlepiej z pierwszej porannej porcji,
  • krew na posiew pobiera się do specjalnych butelek, zwykle z dwóch miejsc, po starannej dezynfekcji skóry,
  • materiał najlepiej pobrać przed rozpoczęciem antybiotykoterapii – lek może zahamować wzrost bakterii w hodowli i dać wynik fałszywie ujemny,
  • próbkę trzeba szybko dostarczyć do laboratorium lub przechować w zalecanych warunkach (np. podłoże transportowe, lodówka).

2. Ocena mikroskopowa

Część materiałów ogląda się od razu pod mikroskopem, np. po barwieniu metodą Grama. Ta prosta technika dzieli bakterie na Gram-dodatnie (fioletowe) i Gram-ujemne (różowe) i pozwala ocenić ich kształt: ziarniaki, pałeczki, dwoinki. Wynik barwienia bywa gotowy w ciągu godziny i pomaga lekarzowi wybrać leczenie wstępne.

Antybiogram metodą krążkowo-dyfuzyjną – strefy zahamowania wzrostu
Antybiogram metodą krążkowo-dyfuzyjną – strefy zahamowania wzrostu. Fot. Microrao, Wikimedia Commons, CC BY-SA 4.0

3. Posiew

Materiał nanosi się na podłoża hodowlane – najczęściej żele na bazie agaru w płytkach Petriego. Stosuje się podłoża ogólne (np. agar z krwią), wybiórcze (pozwalające rosnąć tylko niektórym bakteriom) i różnicujące (np. zmieniające barwę w zależności od tego, czy bakteria fermentuje laktozę). Płytki inkubuje się w cieplarce w temperaturze ok. 35–37°C, w zależności od podejrzewanego patogenu – w tlenie, w atmosferze z dwutlenkiem węgla albo beztlenowo. Pojedyncza bakteria po kilkunastu godzinach daje widoczną gołym okiem kolonię.

4. Identyfikacja

Diagności oceniają wygląd kolonii, a następnie identyfikują gatunek. Kiedyś robiło się to wyłącznie seriami testów biochemicznych. Dziś w wielu laboratoriach stosuje się spektrometrię mas MALDI-TOF: fragment kolonii jest bombardowany laserem, a urządzenie porównuje „odcisk palca” białek bakterii z bazą danych. Identyfikacja trwa wtedy kilka minut. W badaniach moczu laboratorium podaje też liczbę bakterii (np. w CFU/ml), bo od niej zależy, czy wynik świadczy o zakażeniu, czy o zanieczyszczeniu próbki.

5. Antybiogram

Antybiogram to badanie lekowrażliwości – sprawdza, które antybiotyki hamują wzrost wyhodowanej bakterii. Najprostsza metoda to metoda krążkowo-dyfuzyjna: na płytkę z bakteriami kładzie się bibułowe krążki nasączone antybiotykami, a po inkubacji mierzy się średnicę strefy zahamowania wzrostu wokół krążka. Stosuje się też paski z gradientem stężenia i automatyczne systemy, które podają MIC – najmniejsze stężenie leku hamujące wzrost. Wynik interpretuje się według aktualnych wytycznych (w Europie – EUCAST):

Oznaczenie Znaczenie
S – wrażliwy przy standardowym dawkowaniu leczenie jest prawdopodobnie skuteczne
I – wrażliwy przy zwiększonej ekspozycji lek może działać przy wyższej dawce lub gdy kumuluje się w miejscu zakażenia
R – oporny duże ryzyko niepowodzenia leczenia

Ile czeka się na wynik

Typowy posiew moczu z antybiogramem trwa zwykle 2–3 dni. Posiew krwi wymaga dłuższej obserwacji – butelki inkubuje się w automatach przez kilka dni, zanim wynik zostanie uznany za ujemny. Grzyby i prątki gruźlicy rosną znacznie wolniej, więc na wynik czeka się nawet kilka tygodni. Szybkie testy molekularne (PCR) potrafią wykryć wybrane drobnoustroje i geny oporności w ciągu godzin, ale nie zawsze zastępują klasyczny posiew.

Dlaczego to badanie jest ważne

Oporność bakterii na antybiotyki to jedno z największych współczesnych zagrożeń zdrowotnych. Celowane leczenie oparte na antybiogramie pozwala uniknąć niepotrzebnego stosowania leków o szerokim spektrum i ogranicza selekcję szczepów opornych. Wynik badania zawsze interpretuje lekarz – w zestawieniu z objawami, badaniem fizykalnym i innymi wynikami.

Najczęstsze pytania

Co znaczy „flora fizjologiczna” w wyniku?

Że wyhodowano drobnoustroje naturalnie występujące w danym miejscu (np. w gardle) i nie stwierdzono typowych patogenów.

Czy wynik „jałowy” oznacza brak zakażenia?

Zazwyczaj tak, ale może też wynikać z wcześniejszego przyjmowania antybiotyku, złego pobrania lub zakażenia drobnoustrojem, który nie rośnie na standardowych podłożach.

Czy mogę sam odczytać antybiogram i wybrać lek?

Nie. Wybór leku zależy od miejsca zakażenia, dawki, alergii, chorób współistniejących i innych czynników – decyduje lekarz.

Źródło i dalsza lektura: Antybiogram – Wikipedia, wolna encyklopedia.

Przeczytaj też

Zdjęcie wyróżniające: Ocena kolonii bakterii na płytce z agarem. Fot. David McClenaghan, CSIRO, Wikimedia Commons, CC BY 3.0.

Czy ten tekst pomógł Ci zrozumieć temat? Oceń go:

Ten tekst nie ma jeszcze ocen – możesz być pierwszy.

Tekst został utworzony przy pomocy sztucznej inteligencji (modeli językowych).

Redakcja Biologicznie24